一.病毒特征

禽白血病是由禽白血病病毒(Avian leukosis virus，ALV)引起禽的白血病和腫瘤性疾病，是最先被人們關(guān)注并研究的禽的三大腫瘤性疾病之一。我國在1999年從國外引進的白羽肉雞中首次發(fā)現(xiàn)ALV。ALV是雞腫瘤性疾病最主要的病原體也是目前已知的唯一擁有外源性和內(nèi)源性重復(fù)活性的逆轉(zhuǎn)錄病毒。該病主要表現(xiàn)為免疫抑制、生長遲緩、多器官組織腫瘤等特征。對鴿、鵪鶉、鷓鴣等進行人工感染也可引起腫瘤病變。該病目前沒有有效的商品化疫苗，控制本病唯一的辦法是凈化。ALV為單股正鏈RNA病毒，該病毒抵抗能力弱，各種脂溶性、去污劑、蛋白酶等都可以抑制其活性對紫外線有很強的抵抗力，耐低溫，不耐酸堿和高溫，在50℃可保持活性8 min，60℃能保持30s。

二. 防控方法

目前針對禽白血病的主要防控措施就是對種雞場雞群進行凈化，培育無外源性 ALV感染的雞群。該病凈化的關(guān)鍵是建立無禽白血病的核心種群以及有效控制禽白血病的垂直傳播與水平傳播。由于我國不同地區(qū)飼養(yǎng)著不同類型的雞和不同特色的地方品種雞，對這些不同雞群，ALV凈化要求的程度是顯著不同的。在制定凈化方案時需對核心群祖代進行 ALV 感染情況調(diào)查，并結(jié)合養(yǎng)殖場實際情況制定凈化方案。

三.檢測技術(shù)研究進展

國內(nèi)的ALV凈化工作起步較晚，至2013年基本控制了禽白血病疫情發(fā)生，但2015年后ALV又在我國地方品種雞中流行2021年被我國列為《國家動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃（2021—2025年）》中需要防范的主要禽病之一。因目前無有效的商品化疫苗，檢測方法就成為凈化及防控的有效手段。

運用病理組織切片技術(shù)進行雞群ALV感染篩查。通常選取雞群中已經(jīng)產(chǎn)生明顯腫瘤病變的組織，進行常規(guī)制片和蘇木精-伊紅染色，通過顯微鏡觀察病變組織的病理形態(tài)。該方法能確定腫瘤產(chǎn)生但不能確定產(chǎn)生腫瘤的原因。病理組織切片觀察需要具備一定的經(jīng)驗，初學(xué)者容易做出誤判。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，病理組織切片技術(shù)的使用越來越少。

免疫組化技術(shù)是通過標記ALV特有抗原或與ALV相結(jié)合的特異性抗體，對組織內(nèi)分布的抗體或抗原進行原位檢測的技術(shù)。近期相關(guān)研究成果較少，可能是因為抗原表位識別需要特異性抗體，而針對不同亞群ALV就需要設(shè)計合成不同的特異性抗體，成本較高，操作繁瑣。，因此主要應(yīng)用于實驗室研究，而基層推廣應(yīng)用較少。

IFA是利用抗原與抗體反應(yīng)的原理，對抗原或抗體進行熒光色素標記，通過觀察抗原和抗體結(jié)合后是否產(chǎn)生熒光反應(yīng)來進行病毒篩查。如運用此種方法進行ALV檢測必須具備熒光顯微鏡、ALV各亞群特異性單克隆抗體等；可能會出現(xiàn)非特異性熒光，對ALV的檢測篩查產(chǎn)生主觀誤導(dǎo)。以上局限性制約了該方法的推廣應(yīng)用。

3  血清學(xué)檢測

① 中和試驗（NT）

② ELISA

③ 膠體金免疫層析

4  分子生物學(xué)檢測

① RT-PCR
RT-PCR檢測技術(shù)通過提取樣品特異性核酸，結(jié)合微量RNA進行ALV檢測。但是RT-PCR 方法對樣品病毒含量無法定量，而且容易出現(xiàn)假陽性或假陰性，PCR 擴增產(chǎn)物需要電泳觀察等，已逐漸被熒光定量 PCR 技術(shù)代替。

PCR熒光定量 PCR 檢測方法以設(shè)計指定的ALV熒光探針和特定引物為核心，對ALV進行快速檢測和定量，是一種檢測靈敏度高、易于操作、自動化程度高的省時省力的檢測方法。ALV 熒光定量 PCR 檢測方法特異性強、重復(fù)性好，因此被廣泛應(yīng)用。

ddPCR作為一種新型生物檢測技術(shù)已經(jīng)逐步應(yīng)用于病原微生物檢測、病原體定性等多個領(lǐng)域當(dāng)中，其原理是對樣品進行PCR擴增前先進行微滴化處理，通過對PCR擴增后產(chǎn)物進行微滴判讀，來確定檢測樣品為陽性或陰性。其優(yōu)點在于不需要依賴Ct值和標準曲線就能實現(xiàn)絕對核酸定量，對核酸濃度要求低，對特殊樣品有一定的高耐受性，檢測費用低廉。但是ddPCR檢測儀器較為精密，對檢測人員操作要求高，基因倒位或大片段缺失會影響檢測準確性，因而限制了其適用范圍。

LAMP檢測技術(shù)從問世到現(xiàn)在已有20多年， LAMP 檢測技術(shù)不需要對各階段反應(yīng)溫度進行繁瑣設(shè)定，全過程在同一溫度設(shè)定條件下即可完成。不僅如此，這項檢測技術(shù)還大大降低了對各種設(shè)備儀器的要求，反應(yīng)時間也比RT-PCR縮短了一半以上。

高敏熒光微球檢測方法是根據(jù)時間分辨熒光免疫層析原理設(shè)計的一種應(yīng)用于ALV檢測的新型檢測方法，其通過儀器讀取反應(yīng)后免疫復(fù)合物中的熒光微球發(fā)光值，測算ALV p27抗原數(shù)值，從而進一步判定是否感染ALV。此種方法操作簡便，可適用于大批量樣品的快速定量檢測，與膠體金試紙條檢測方法一樣，可作為基層使用的快速診斷檢測技術(shù)。

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