各省、自治區(qū)、直轄市動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)，新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站：

　　為貫徹落實《農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于印發(fā)<國家動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃（2021-2025年）>的通知》（農(nóng)牧發(fā)〔2021〕11號）要求，做好種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測工作，我中心制定了《2021年種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測工作實施方案》，現(xiàn)印發(fā)給你們，請按照本方案配合做好2021年種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測的樣品采集和信息填報工作。 

附件

2021年種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測工作實施方案

一、監(jiān)測目的

掌握種畜禽場重大動物疫病和主要垂直傳播性疫病流行狀況，跟蹤監(jiān)測病原變異特點與趨勢，查找疫病傳播風(fēng)險因素，促進(jìn)種畜禽場主要疫病防控和凈化。

二、監(jiān)測內(nèi)容

（一）監(jiān)測病種

1. 原種豬場/種公豬站

非洲豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病等6種疫病。

2. 種禽場

禽流感、禽白血病、雞白痢等3種疫病。

3. 種牛羊場

口蹄疫、布魯氏菌病、小反芻獸疫等3種疫病。

（二）監(jiān)測方法

血清學(xué)方法主要采用ELISA、HI和SAT。病原學(xué)方法主要采用PCR和熒光PCR。必要時將抽取部分樣品進(jìn)行病毒、細(xì)菌分離鑒定和基因序列測定，調(diào)查分析病原分型和變異情況。具體監(jiān)測項目以及方法見附表1-1。

三、監(jiān)測場點設(shè)置

（一）原種豬場/種公豬站

全國共確定26個?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）的81個重點原種豬場、7個種公豬站作為監(jiān)測場點（見附表2-1）。

（二）種禽場

全國共確定23個省（自治區(qū)、直轄市）的5個曾祖代禽場、70個祖代禽場、4個國家級家禽基因庫作為監(jiān)測場點（見附表3-1、3-2、3-3）。

（三）種牛/奶牛場/種公牛站

全國共確定19個省（自治區(qū)、直轄市）的26個種牛場/奶牛場作為監(jiān)測場點（見附表4-1）。

（四）種羊場

全國共確定14個?。ㄗ灾螀^(qū)、直轄市）的15個種羊場作為監(jiān)測場點（見附表4-2）。

四、樣品采集和信息填報

（一）樣品采集

樣品采集要遵循隨機采樣的原則。每個動物在同時采集血清和組織/拭子等樣品時，應(yīng)確保同一個體的不同類型樣品的編號一一對應(yīng)。具體采樣要求見附件1。

（二）采樣信息填報

各省和各場按種畜禽場種類填寫對應(yīng)的《采樣記錄表》（見附表2-2、附表3-4、附表4-3、附表4-4），各省和各場在開展采樣工作的同時開展流行病學(xué)調(diào)查，內(nèi)容包括該場養(yǎng)殖信息、防疫信息等，填寫《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》。以上表格請在中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站下載?！恫蓸佑涗洷怼诽顚懲瓿珊笠允閱挝话l(fā)送至郵箱zxqjcxx@163.com?！斗N畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》通過電腦登陸鏈接或手機掃描二維碼在網(wǎng)頁或手機端填寫并提交。

五、監(jiān)測時間

2021年5月31日前完成采樣工作，9月30日前完成實驗室檢測工作，11月30日前完成監(jiān)測報告。

六、任務(wù)分工

中國動物疫病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)組織實施并承擔(dān)實驗室檢測及分析，相關(guān)省級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)配合完成采樣與流行病學(xué)調(diào)查，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所與山東農(nóng)業(yè)大學(xué)參與完成種禽場部分疫病檢測工作。

七、聯(lián)系人及聯(lián)系方式

聯(lián) 系 人：中國動物疫病預(yù)防控制中心  張碩

聯(lián)系電話：010-59198951

傳    真：010-59198951

電子郵箱：zxqjcxx@163.com

地    址：北京市大興區(qū)生物醫(yī)藥基地天貴大街17號，中國動物疫病預(yù)防控制中心，郵編102600

附件：種畜禽場采樣說明

附表：1-1.監(jiān)測項目及方法

      2-1.原種豬場/種公豬站名單及采樣數(shù)量

2-2.原種豬場/種公豬站采樣記錄表

3-1.曾祖代雞場名單及采樣數(shù)量

3-2.祖代禽場名單及采樣數(shù)量

      3-3.國家級家禽基因庫名單及采樣數(shù)量

      3-4.種禽場采樣記錄表

      4-1.種牛/奶牛場/種公牛站名單及采樣數(shù)量

      4-2.種羊場名單及采樣數(shù)量

4-3.種牛/奶牛場/種公牛站采樣記錄表

4-4.種羊場采樣記錄表

附件

種畜禽場采樣說明

一、采樣范圍

種畜禽場主要疫病監(jiān)測場點名單中確定的88個種豬場/種公豬站、79個種禽場，26個種牛場/奶牛場/種公牛站和15個種羊場。

二、樣品要求

（一）原種豬場/種公豬站

1. 采樣數(shù)量

每個原種豬場采集豬血清樣品40份，對應(yīng)豬只扁桃體樣品40份，對應(yīng)種公豬精液5份，以及國外進(jìn)口冷凍精液3份。仔豬（產(chǎn)床或保溫箱，最好7日內(nèi)）糞便樣品10份。樣品來源原則上不少于3棟豬舍的豬只，其中包含種公豬5頭，經(jīng)產(chǎn)母豬25頭（1-2胎5頭，3-4胎10頭，5-6胎10頭），后備母豬10頭（40-60kg 5頭，90-110kg 5頭）。每個種公豬站（要求為向社會供精的獨立種公豬站）采集血清樣品5頭份、對應(yīng)豬只扁桃體樣品5份和精液5份。

2. 樣品要求

①血清樣品。經(jīng)耳靜脈/前腔靜脈/頸靜脈竇每份采集3-5 mL全血，凝固后析出血清不少于1.5 mL，用2 mL離心管冷凍保存。

②扁桃體樣品。利用扁桃體采樣器（鼻捻子、開口器和采樣槍）采樣，1頭豬采2份，每份樣品體積必須大于0.3 cm×0.3 cm×0.3cm，用2 mL離心管冷凍保存。

③豬精液樣品。用人工方法采集，避免加入防腐劑，收集至滅菌離心管中，冷凍保存，精液量不少于2mL。

④仔豬糞便樣品。采樣管加入采樣液（磷酸鹽緩沖液保護(hù)液（含30%甘油和10%雙抗））。用滅菌拭子采集像黃豆一樣大小的仔豬糞便，放入采樣管中。冷凍保存。

3. 樣品編號

血清樣品以“AX1～AXn”，扁桃體樣品以“AB1～ABn”，豬精液樣品以“AJ1～AJn”方式編寫。同一個體的血清、扁桃體、精液編號一一對應(yīng)。豬糞便樣品以“AF1～AFn”方式編寫。

4. 信息填寫

采樣同時調(diào)查豬場養(yǎng)殖、防疫信息，填寫《原種豬場/種公豬站采樣記錄表》（附表2-2）和《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表（豬）》。以上表格請在中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站下載?！恫蓸佑涗洷怼诽顚懲瓿珊笠允閱挝话l(fā)送至郵箱zxqjcxx@163.com?！斗N畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》通過電腦登陸鏈接或手機掃描二維碼填寫并提交。如因特殊情況無法采夠上述數(shù)量樣品，需在《采樣記錄表》上注明原因并經(jīng)種場負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。

（二）種禽場

1. 采樣數(shù)量

①曾祖代禽場。每個品系采集種蛋150枚、血清100份，每個場采集咽喉/泄殖腔拭子100份。

②祖代禽場。祖代雞場每個場采集種蛋150枚、血清100份、咽喉/泄殖腔拭子100份；祖代水禽場每個場采集血清100份、咽喉/泄殖腔拭子100份。

③國家級家禽基因庫。每個基因庫按照地方雞種基因庫和水禽基因庫存欄量的10%比例采集血清和種蛋；每個基因庫采集咽喉/泄殖腔拭子100份。

2. 樣品要求

樣品來源原則上不少于3棟禽舍的開產(chǎn)后種雞。所采集的血清、咽喉/泄殖腔拭子樣品應(yīng)一一對應(yīng)，種蛋樣品應(yīng)來自對應(yīng)禽舍。

①血清樣品。每份采集3mL～4mL全血，凝固后析出血清不少于1mL，用1.5mL離心管冷凍保存。

②拭子樣品。拭子建議用塑料柄的聚酯纖維拭子。同一家禽的咽喉/泄殖腔拭子放在同一個離心管中，加1mL磷酸鹽緩沖液保護(hù)液（內(nèi)含30%甘油和阻止細(xì)菌、真菌生長的抗生素），用1.5mL離心管冷凍保存。

③蛋清樣品。每枚種蛋采集不少于3mL蛋清（注意避免采集粘稠的蛋清），用2個2mL離心管分裝后冷凍保存。

3. 樣品編號

雞、鴨、鵝分別用D、E、F表示，血清樣品用X、蛋清樣品用D、拭子樣品用S表示。雞血清樣品以“DX1～DXn”模式編寫，鴨血清樣品以“EX1～EXn”模式編寫，鵝血清樣品以“FX1～FXn”模式編寫，雞蛋清樣品以“DD1～DDn”模式編寫，鴨蛋清樣品以“ED1～EDn”模式編寫, 鵝蛋清樣品以“FD1～FDn”模式編寫,雞咽喉/泄殖腔拭子以“DS1～DSn”模式編寫, 鴨咽喉/泄殖腔拭子以“ES1～ESn”模式編寫, 鵝咽喉/泄殖腔拭子以“FS1～FSn”模式編寫。同一個體的血清樣品與咽喉/泄殖腔拭子樣品編號一一對應(yīng)。

4. 信息填寫

采樣同時調(diào)查禽場養(yǎng)殖、防疫信息，填寫《種禽場采樣記錄表》（附表3-4）、《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表（雞）》和《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表（鴨/鵝）》。以上表格請在中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站查看并下載?！恫蓸佑涗洷怼诽顚懲瓿珊笠允閱挝话l(fā)送至郵箱zxqjcxx@163.com?！斗N畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》通過電腦登陸鏈接或手機掃描二維碼填寫并提交。如因特殊情況無法采夠上述數(shù)量樣品，需在《采樣記錄表》上注明原因并經(jīng)種場負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。

（三）種牛/奶牛場/種公牛站

1. 采樣數(shù)量

每場采集牛血清樣品40份，對應(yīng)O-P液40份，口/鼻拭子40份。

2. 樣品要求

樣品來源原則上不少于3棟牛舍，所采集的血清、O-P液和拭子應(yīng)一一對應(yīng)，采樣時應(yīng)兼顧不同生產(chǎn)階段牛的比例。

①血清樣品。每份采集3-5 mL全血，凝固后析出血清不少于1.5 mL，用2 mL離心管冷凍保存。

②O-P液樣品。每份不少于5mL，放在提前放好MEM或PBS緩沖液的15mL離心管中冷凍保存。

③口/鼻拭子樣品。同一個體的拭子放在同一個5mL離心管中，加2.5mL磷酸鹽緩沖液保護(hù)液（內(nèi)含30%甘油和10%雙抗），冷凍保存。

3. 樣品編號

牛血清樣品以“BX1～BXn”模式編寫，牛O-P液樣品以“BY1～BYn”模式編寫，?？?鼻拭子樣品以“BS1～BSn”模式編寫，同一頭牛的血清樣品與O-P液樣品、口/鼻拭子樣品編號一一對應(yīng)。

4. 信息填寫

采樣同時調(diào)查牛場養(yǎng)殖、防疫信息，填寫《種牛場采樣記錄表》（附表4-3）和《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表（牛）》。以上表格請在中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站下載?！恫蓸佑涗洷怼诽顚懲瓿珊笠允閱挝话l(fā)送至郵箱zxqjcxx@163.com。《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》通過電腦登陸鏈接或手機掃描二維碼填寫并提交。如因特殊情況無法采夠上述數(shù)量樣品，需在《采樣記錄表》上注明原因并經(jīng)種場負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。

（四）種羊場

1. 采樣數(shù)量

每場采集羊血清樣品40份，對應(yīng)O-P液40份，眼/鼻拭子40份。

2. 樣品要求

樣品來源原則上不少于3棟羊舍，所采集的血清、O-P液和拭子樣品應(yīng)一一對應(yīng)，采樣時應(yīng)兼顧不同生產(chǎn)階段羊的比例。

①血清樣品。每份采集3-5 mL全血，凝固后析出血清不少于1.5 mL，用2 mL離心管冷凍保存。

②O-P液樣品。每份不少于5mL，放在提前放好MEM或PBS緩沖液的15mL離心管中冷凍保存。

③眼/鼻拭子樣品。同一個體的拭子放在同一個5mL離心管中，加2.5mL磷酸鹽緩沖液保護(hù)液（內(nèi)含30%甘油和10%雙抗），冷凍保存。

3. 樣品編號

羊血清樣品以“CX1～CXn”模式編寫，羊O-P液樣品以“CY1～CYn”模式編寫，羊眼/鼻拭子以“CS1～CSn”模式編寫，同一只羊的血清樣品與O-P液樣品、眼/鼻拭子樣品編號一一對應(yīng)。

4. 信息填寫

采樣同時調(diào)查羊場養(yǎng)殖、防疫信息，填寫《種羊場采樣記錄表》（附表4-4）和《種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表（羊）》。以上表格請在中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站下載?！恫蓸佑涗洷怼诽顚懲瓿珊笠允閱挝话l(fā)送至郵箱zxqjcxx@163.com?！斗N畜禽場監(jiān)測調(diào)查表》通過電腦登陸鏈接或手機掃描二維碼填寫并提交。如因特殊情況無法采夠上述數(shù)量樣品，需在《采樣記錄表》上注明原因并經(jīng)種場負(fù)責(zé)人簽字確認(rèn)。

附件：

1.2021年種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測工作實施方案 .docx
2. 附表2-1至2-4種豬場表 2021.xlsx
3. 附表3-1至3-4種禽場表 2021.xlsx
4. 附表4-1至4-4種牛羊場表 2021.xlsx
5. 種畜禽場監(jiān)測調(diào)查表 2021.docx

     中國動物疫病預(yù)防控制中心  

　　　　                                   2021年4月30日